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    使用尺寸排阻色譜柱時(shí),需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵事項

    更新時(shí)間:2024-05-23點(diǎn)擊次數:57
      尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應用于生物分析領(lǐng)域的工具,其工作原理主要基于分子大小差異進(jìn)行分離。利用柱內固定相中孔隙與分子間的物理作用來(lái)實(shí)現分離。具體來(lái)說(shuō),聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選,較大的分子無(wú)法通過(guò)尺寸較小的孔道,只有較小的分子才能通過(guò)這些孔道,從而實(shí)現不同分子尺寸的分離。
      使用尺寸排阻色譜柱時(shí),需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵事項:
      1、流動(dòng)相的選擇:流動(dòng)相應根據樣品的溶解性來(lái)選擇,它應與凝膠本身具有相似性,同時(shí)要求黏度低,與樣品的折光率有較大差異。這樣可以確保流動(dòng)相能夠潤濕凝膠并防止吸附作用的發(fā)生。
      2、進(jìn)樣量控制:對于體積排阻色譜來(lái)說(shuō),進(jìn)樣量不宜超過(guò)柱體積的5%。例如,一根規格為300 x 7.8mm的色譜柱的柱體積約為14mL,因此進(jìn)樣量不應超過(guò)700uL??刂七m當的進(jìn)樣量是保證分離效果和避免柱子過(guò)載的重要條件。
      3、樣品的準備:在注入樣品之前,需要確保樣品已經(jīng)被適當地溶解并且過(guò)濾,以避免固體顆?;蛭慈芙獾奈镔|(zhì)對色譜柱造成損害。
      4、溫度的控制:尺寸排阻色譜通常需要在恒溫條件下進(jìn)行,以保持色譜柱的穩定性和提高分離效率。
      5、色譜柱的維護:使用后應及時(shí)清洗色譜柱,以去除殘留的樣品和流動(dòng)相,防止柱內發(fā)生堵塞或微生物生長(cháng)。
      6、系統監測:在操作過(guò)程中,應密切監控系統壓力和檢測器響應,以便及時(shí)發(fā)現任何異常情況并采取相應措施。
      綜上所述,通過(guò)遵循這些注意事項,可以確保尺寸排阻色譜柱的有效使用,同時(shí)也能延長(cháng)其使用壽命,獲得可靠的分析結果。在進(jìn)行實(shí)驗前,還應仔細閱讀色譜柱的使用說(shuō)明書(shū),以了解更詳細的操作指南和建議。

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